欧洲鲈鱼饲料中添加黑水虻幼虫粉可增强其免疫反应和抗氧化能力

黑水虻幼虫粉(BSFLM)被证明是一种有前途的鱼粉 (FM) 替代品，用于包括欧洲鲈鱼在内的几种鱼类的日粮。然而，它对抗氧化能力的影响以及经过处理的鱼的免疫反应仍然知之甚少。

本次试验用不同水平的黑水虻幼虫粉部分替代鱼粉对欧洲鲈鱼的抗氧化状态、非特异性免疫、转录组反应和对溶藻弧菌攻击的抵抗力的影响。

通过替换日粮中0%、25%、35% 和 50%的鱼粉来配制日粮。每种日粮被随机分配到四个鱼组（每组3个平行）（初始平均体重，12.1 ± 0.21 g）（每个水族箱20 条鱼）。每天喂鱼3次至明显饱食，试验为60天。

结果表明黑水虻幼虫粉50%替代日粮中鱼粉不会对鱼类健康产生负面影响，可能会增强抗氧化状态和欧洲鲈鱼的免疫反应。

本研究中使用的黑水虻幼虫粉来自埃及 Kafr El Sheikh 的 Kafr El Sheikh 大学水产养殖和渔业学院。 

黑水虻幼虫粉蛋白替代日粮中0%、25%、35%和50%的鱼粉（标记为BSFLM0、BSFLM25、BSFLM35 和 BSFLM50）。这些日粮的成分被彻底粉碎、适当混合并制成颗粒。

240条欧洲鲈鱼（平均初始体重12.10±0.21g）来自埃及亚历山大省Wadi Mariout 的一个私人养鱼场。

鱼运送到实验室并放置 14 天以适应实验室环境。在驯化期间，以基础对照日粮喂养鱼。然后将鱼随机分配到12个150升水族箱（n = 3）（每个水族箱 20 条鱼），每3个水族箱为一个实验组。用手喂鱼，直到视觉饱食（每天三次），持续 60 天。

试验结束时进行血液和组织取样，测试非特异性免疫反应，提取氧化应激生物标志物和RNA提取、cDNA合成和qRT-PCR，并进行定量逆转录聚合酶链反应和攻毒试验。

3.1. 免疫反应

表3说明了实验组之间免疫参数的差异。与对照组相比，实验组之间的吞噬活性（PA）和吞噬细胞指数(PI)有显著差异，所有黑水虻幼虫粉组都提高了处理鱼的吞噬细胞能力，它们之间没有显著差异。同样，与对照组相比，黑水虻幼虫粉组的血清中性粒细胞耗氧量和溶菌酶（LYZ） 活性显著增加。BSFLM35和BSFLM50 组之间没有显著差异。

3.2. 氧化应激参数

表4显示了饲养不同黑水虻幼虫粉水平的欧洲鲈鱼饲喂60天后的抗氧化参数的显著差异。与BSFLM25组和对照组相比，BSFLM35和BSFLM50组血清丙二醛（MDA）水平显著升高。此外，与对照组相比，所有黑水虻幼虫粉组血清的过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性均显著升高。

3.3. 基因转录

在本研究中，与对照组相比，黑水虻幼虫粉组的肝脏 IL-10（图 1A）、IL-1β（图 1B）和HSP70（图1C）基因的 mRNA 表达水平显著增加。BSFLM50组在所有其他组中表现出最高的表达值。

3.4. 攻毒试验和抗病性

图2显示，当用溶藻弧菌进行实验攻击时，黑水虻幼虫粉组的相对存活率（RPS）与对照组相比显著增加。BSFLM0组的鱼表现出最高的死亡率（75%），其次是BSFLM25、BSFLM35和BSFLM50，分别为55%、40%和35%。BSFLM50组在所有实验组中的死亡率百分比最低。

研究的结果表明，用不同水平的黑水虻幼虫粉部分替代日粮中的鱼粉不会对欧洲鲈鱼的健康状况产生有害影响。

黑水虻幼虫粉可以增强非特异性免疫反应，如吞噬活性、吞噬细胞指数、血清溶菌酶和中性粒细胞耗氧量，增强抗氧化能力，增加HSP70、IL-10和IL-1β基因，并提高了欧洲鲈鱼对溶藻弧菌攻击的抵抗力。然而，应考虑进一步详细的研究，特别是对鱼类先天免疫、几种免疫和抗氧化基因的转录、抗氧化机制和黑水虻幼虫粉的抗菌效率。